La mezcla DNA/Oligo se debe entregar en un volumen final de 16 µl, en un tubo eppendorf de tapa plana de 0.2 ml para PCR, sin anotaciones en la tapa. Dicha mezcla debe contener 10 pmolas del oligo elegido para secuenciar [por ejemplo, 1 µl de solución de oligo 10 µM (pmol/µl)] y 300-500 ng de plásmido si su tamaño es de 3-5 Kb. Si el plásmido es del doble de tamaño, entonces se deben entregar 600-1000 ng. En caso de productos de PCR, éstos se deben purificar por gel y entregar 100-120 ng, mezclados con 10 pmolas de oligo, en el mismo volumen final de 16 µl. La calidad del proceso de secuenciación depende principalmente de la calidad y cantidad del DNA entregado. Antes de enviar las muestras, se recomienda analizarlas por gel y cuantificarlas por nanodrop. La cuantificación por gel es subjetiva y no debe usarse para estimar la concentración de DNA.

La USSDNA puede adicionar los oligonucleótidos:

m13/pUC -40 FORWARD 5´-GTT TTC CCA GTC ACG TTG TA-3´
m13/pUC REVERSE 5´-TTG TGA GCG GAT AAC AAT TTC-3´
T7 PRIMER 5´-TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG-3´
SK PRIMER 5´-CGC TCT AGA ACT AGT GGA TC-3´
T3 PRIMER 5´-CGC ATT TAA CCC TCA CTA AAG-3